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紫外可見分光光度計UV3100

2024-01-25科學

走進儀器 | 紫外可見分光光度計UV3100

紫外可見分光光度計是基於紫外可見分光光度法原理,利用物質分子對紫外可見光譜區的放射線吸收來進行分析的一種分析儀器。

發展歷史

1852年

比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)在1729年和朗伯(Lambert)在1760年所發表的文章,提出了分光光度的基本定律,即液層厚度相等時,顏色的強度與呈色溶液的濃度成比例,從而奠定了分光光度法的理論基礎,這就是著名的朗伯比爾定律。

1854年

杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將朗伯比爾定律套用於定量分析化學領域,並且設計了第一台比色計。

1918年

美國國家標準局制成了第一台紫外可見分光光度計。此後,紫外可見分光光度計經不斷改進,又出現自動記錄、自動打印、數位顯示等各種型別的儀器,使分光光度法的靈敏度和準確度也不斷提高,套用範圍不斷擴大。

結構與功能

紫外可見分光光度計主要由光源、單色器、吸收池、檢測器和訊號處理器等部件組成。

(1)光源:提供符合要求的入射光;

(2)單色器:將光源產生的復合光分解為單色光和分出所需的單色光束;

(3)吸收池:又叫比色皿,用於盛放待測溶液和決定透光液層厚度的器件;

(4)檢測器:將透過吸收池的光訊號變成可測的電訊號;

(5)訊號顯示系統:數位顯示和自動記錄型裝置。

套用領域

(1)細菌培養:OD測量通常使用600nm的波長快速進行測試,以估計細胞濃度並跟蹤生長。

(2)藥物分析:最常見的用途之一是在制藥行業。如:Kuljan in 等人透過將阿侖膦酸鈉與Fe3+絡合,用紫外分光光度法測定了阿侖膦酸鈉的含量。

(3)水質分析:如【GB/T 5750.6-2006 生活飲用水標準檢驗方法 金屬指標】水中鋁離子與水楊基熒光酮及陽離子表面活性劑氯代十六烷基呲澱在 pH 5.2~6.8 範圍內形成玫瑰紅色三元絡合物,可比色定量。

(4)其他套用:環境監測、教學研究、計量校準、石油化工等。

各項指標的重要性

(1)波長準確度的重要性

波長準確度是指波長的實際測定值與理論值(真值)的差,其波長準確度是很重要的技術指標。若要比對兩台紫外可見分光光度計對同一樣品的分析測試結果,如果儀器的波長準確度不好,就無法進行比較,或比較不出正確的結果。同一物質進行測試時,由於不同波長時莫耳吸光系數不同,就會有不同的靈敏度,即使是同一樣品,測試的數據也會不相同。如果使用者要用一台紫外可見分光光度計做定量分析,若儀器的波長準確度不好,也會因儀器的波長誤差而產生很大的分析誤差。

(2)穩定性的重要性

其穩定性應包括基線漂移和光度重復性兩個方面。使用時有一個很重要的原則或宗旨就是儀器要穩定可靠。如果一台儀器的穩定性差,就不可能得到滿意的分析測試結果。儀器的穩定性是制造、挑選或使用紫外可見分光光度計的關鍵問題之一。

有些使用者把基線漂移作為穩定性,實際上基線漂移只是穩定性的內容之一。如果一台紫外可見分光光度計的基線漂移符合使用要求,但其光度重復性很差,它仍然不能滿足使用者的使用要求;反之,如果一台紫外可見分光光度計的光度重復性符合使用要求,但其基線漂移大,它也不能滿足使用要求。只有基線漂移很小、重復性也很好的儀器才能滿足使用要求,才是好儀器。

(3)基線平直度的重要性

基線平直度是指每個波長上的光度雜訊,它是使用者最關心的技術指標之一,也是儀器各個波長上主要分析誤差的來源之一,它決定儀器在各個波長下的分析檢測濃度的下限(或決定各個波長下儀器的靈敏度)。

(4)線性動態範圍的重要性

線性動態範圍是影響分析測試誤差的技術指標。如果儀器的線性動態範圍很寬,則無論是對很稀的樣品還是對很濃的樣品進行分析時,其分析測試的結果都在所要求的誤差範圍內。所以應選擇線性動態範圍大的紫外可見分光光度計。

其線性動態範圍取決於儀器的雜散光和雜訊,它們是分測試誤差的主要來源。雜散光限制被分析測試樣品濃度的上限,雜訊限制被分析樣品濃度的下限。其線性動態範圍非常重要,它限制儀器的使用範圍(即限制儀器的適用性)。

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