胰酪大豆腖液體培養基(以下簡稱TSB)是一種廣譜性培養基,用於細菌的培養和藥品及生物制品的無菌實驗及藥品微生物限度檢查中供試品的稀釋或增菌。特別對無菌工藝環境中源自人體的細菌、芽孢和真菌有良好的促生長效果,是無菌工藝模擬試驗常用的培養基。本文將從 TSB的成分與原理 ; 藥典各章節中TSB的使用以及各種質控菌在TSB裏面的生長狀況、特征 ; TSB使用過程中常見問題的解答等方面 給大家一一介紹。
1.成份&原理
胰酪腖: 胰酪腖,又稱胰蛋白腖,由胰蛋白酶消化酪蛋白所得,其胺基酸比較齊全,特別是色胺酸的含量比較高。
大豆木瓜蛋白酶水解物: 木瓜蛋白酶消化大豆粉所得水解物,含有豐富的碳水化合物和維生素,尤其是維生素B1含量較高,適用包括真菌在內的極廣泛的細菌生長。
磷酸氫二鉀: 起到緩沖作用,維持恒定pH值。
無水葡萄糖: 提供微生物利用的直接碳源。
氯化鈉: 維持微生物的滲透壓。
2.質控菌株
中國藥典2020版檢驗流程中涉及TSB培養基的章節有:
1.【中國藥典】2020版四部 通則1101無菌檢查法 供試品的無菌檢查。
2.【中國藥典】2020版四部 通則1105 非無菌產品微生物限度檢查:微生物計數法。
3.【中國藥典】2020版四部 通則1106 非無菌產品微生物限度檢查:控制菌檢查法。
其中用到的質控菌株整理如下表:
3.不同微生物在TSB中生長情況
金黃色葡萄球菌 CMCC(B)26003在TSB中:試管 整體渾濁 ,底部有大量菌體沈積 。
大腸埃希氏菌 CMCC(B)44102在TSB中:試管 整體渾濁 ,底部有大量菌體沈積 。
銅綠假單胞菌 CMCC(B)10104在TSB中:試管 整體渾濁 ,且液體表面有菌膜生成。
枯草芽孢桿菌 CMCC(B)63501在TSB中:試管 整體渾濁 ,菌體團成絮狀 ,沈積在試管底部 ,偶爾液體表面形成有褶皺的菌膜 。
乙型副傷寒沙門氏菌 CMCC(B)50094在TSB中:使試管 整體渾濁 ,底部有大量菌體沈積。
白色念珠菌 CMCC(F)98001在TSB中:試管 上層微渾 ,底部有大量菌體沈積 。
黑曲黴 CMCC(F)98003在TSB中:試管 澄清 ,有白絮狀菌絲體懸在試管底部 。
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