胰酪大豆胨液体培养基(以下简称TSB)是一种广谱性培养基,用于细菌的培养和药品及生物制品的无菌实验及药品微生物限度检查中供试品的稀释或增菌。特别对无菌工艺环境中源自人体的细菌、芽孢和真菌有良好的促生长效果,是无菌工艺模拟试验常用的培养基。本文将从 TSB的成分与原理 ; 药典各章节中TSB的使用以及各种质控菌在TSB里面的生长状况、特征 ; TSB使用过程中常见问题的解答等方面 给大家一一介绍。
1.成份&原理
胰酪胨: 胰酪胨,又称胰蛋白胨,由胰蛋白酶消化酪蛋白所得,其氨基酸比较齐全,特别是色氨酸的含量比较高。
大豆木瓜蛋白酶水解物: 木瓜蛋白酶消化大豆粉所得水解物,含有丰富的碳水化合物和维生素,尤其是维生素B1含量较高,适用包括真菌在内的极广泛的细菌生长。
磷酸氢二钾: 起到缓冲作用,维持恒定pH值。
无水葡萄糖: 提供微生物利用的直接碳源。
氯化钠: 维持微生物的渗透压。
2.质控菌株
中国药典2020版检验流程中涉及TSB培养基的章节有:
1.【中国药典】2020版四部 通则1101无菌检查法 供试品的无菌检查。
2.【中国药典】2020版四部 通则1105 非无菌产品微生物限度检查:微生物计数法。
3.【中国药典】2020版四部 通则1106 非无菌产品微生物限度检查:控制菌检查法。
其中用到的质控菌株整理如下表:
3.不同微生物在TSB中生长情况
金黄色葡萄球菌 CMCC(B)26003在TSB中:试管 整体浑浊 ,底部有大量菌体沉积 。
大肠埃希氏菌 CMCC(B)44102在TSB中:试管 整体浑浊 ,底部有大量菌体沉积 。
铜绿假单胞菌 CMCC(B)10104在TSB中:试管 整体浑浊 ,且液体表面有菌膜生成。
枯草芽孢杆菌 CMCC(B)63501在TSB中:试管 整体浑浊 ,菌体团成絮状 ,沉积在试管底部 ,偶尔液体表面形成有褶皱的菌膜 。
乙型副伤寒沙门氏菌 CMCC(B)50094在TSB中:使试管 整体浑浊 ,底部有大量菌体沉积。
白色念珠菌 CMCC(F)98001在TSB中:试管 上层微浑 ,底部有大量菌体沉积 。
黑曲霉 CMCC(F)98003在TSB中:试管 澄清 ,有白絮状菌丝体悬在试管底部 。
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